細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。
2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。因路途耽擱等因素，細胞會有部分脫落。先把細胞放入培養(yǎng)箱里靜止3小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，然后在超凈臺中將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基吸出一部分，保留大約5-6ml左右在培養(yǎng)瓶里。將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
3、24小時后，細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?span lang="EN-US">37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
