本制品是采用SYBR® Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的最適濃度SYBR®Green I,是一種2×濃度的Premix Type試劑,進(jìn)行實驗時,PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。制品中使用了抗Taq抗體的的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,與Real Time PCR用最適Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴(kuò)增,大大提高PCR的擴(kuò)增效率,可以進(jìn)行高靈敏度的Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
另外,本制品中添加了Tli RNaseH(耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時,可以******限度抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。
本制品適合于快速Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng),可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測,重復(fù)性好,可信度高。
*:Takara Bio使用SYBR® Green I 作為研究試劑已得到Molecular Probes Inc.的許可。SYBR®為Molecular Probes Inc.的注冊商標(biāo)。
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■ 保存 |
4℃。
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注意: |
1. 4℃可保存6個月。 |
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2. 避光保存,避免污染。 |
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3. 干冰運(yùn)輸,到貨后4℃避光保存。 |
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4. 長期保存請置于-80℃,勿存于-20℃。產(chǎn)品融解后請于4℃保存,并在6個月內(nèi)用完。 |
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■ 試劑盒特長 |
1. 適用于Real Time PCR反應(yīng),可以快速、準(zhǔn)確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。
2. 在2×濃度的Premix中,預(yù)先混有SYBR® Green I,PCR反應(yīng)液配制時,只需加入模板、引物、滅菌蒸餾水便可進(jìn)行Real Time
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PCR反應(yīng),操作簡單方便。 |
3. DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS,可以進(jìn)行Hot Start法PCR反應(yīng),再與Takara公司獨自開發(fā)的Buffer系統(tǒng)相結(jié) |
合,具有高擴(kuò)增效率,高擴(kuò)增靈敏度之特點。 |
4. 在2×濃度的Premix中,預(yù)先添加了耐熱性RNaseH (Tli RNaseH),可以******限度抑制以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時,由于 |
cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。 |
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■ 注意事項 |
1. 使用前,請上下輕輕顛倒混勻,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應(yīng)效果不佳。
(1) 請勿渦旋振蕩混勻。
(2) SYBR® Premix Ex Taq (2× conc.) 在-80℃存放可能會產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手握緩慢溶解,于室溫短時間避光
放置,輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會導(dǎo)致溶液成分不均勻,使用前務(wù)必充分混勻試劑。
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2. 配制反應(yīng)液時,試劑請于冰上放置。
3. 本制品中含有熒光染料SYBR® Green I,保存制品或配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強(qiáng)光照射。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。 |